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外泌体研究又一利器 — IZON外泌体分离鉴定系统

    近几年外泌体研究火热,文章数量一直居高不下,国内的外泌体研究起步较晚,但从趋势来看,国内的外泌体研究正在逐渐加速发展。

越来越多的研究者将外泌体与转化医学联系起来,特别是液体活检方向,相信假以时日,外泌体必然为疾病的诊断与治疗带来重大改革。

广州云星科学仪器有限公司顺应科研需求,代理了IZON公司针对外泌体研究而开发的利器 — 外泌体分离鉴定系统,这将为外泌体的研究带来全新的视角。

 




TRPS—可控电阻式脉冲传感技术


Tunable Resistive Pulse Sensing(TRPS )是目前可用于纳米粒子表征的功能最强大的技术,也是纳米粒子研究、发展和质控中重要的工具,该技术的应用在纳米医学和细胞外囊泡研究的领域中尤为突出。IZON公司所开发的外泌体分离鉴定系统正是基于该原理。 

TRPS技术基于阻抗原理,与激光无关。当充满电解液的纳米孔上下两边施加一定的电压时,纳米孔内会产生离子电流。当颗粒通过纳米孔会取代一定的电解液增加电阻,继而产生电阻脉冲信号,该脉冲信号大小与颗粒的体积成正比。


TRPS 技术应用

鉴于分子尺寸已能得到测定且亚微尺寸受到人们较高的关注度,TRPS目前主要关注范围是亚微米的样品,检测对象是尺寸范围为40 nm -10 μm的颗粒??帕4笮『团ǘ鹊募觳馔ü褂靡阎叽绾团ǘ鹊男U帕@词迪?。当颗粒流经纳米孔,会产生一个电阻脉冲信号,通过该信号和校正颗粒的对比,来实现颗粒特征的逐个测定。


·     1. 颗粒大小和浓度的检测通过使用已知尺寸和浓度的校正颗粒来实现。当颗粒流经纳米孔,会产生一个电阻脉冲信号,通过该信号和校正颗粒的对比,来实现颗粒特征的逐个测定。

·     2. 颗粒流速与颗粒浓度成正比,所以可以准确测定不同尺寸的颗粒浓度。于此同时,可以逐个测得每个颗粒的尺寸。TRPS的核心理念在于可以同时提供准确的颗粒浓度和颗粒尺寸分布。

 


1 尺寸测定


TRPS中的离子电流电阻式脉冲单颗粒通过纳米孔时的,可视离子电流“脉冲”单电流脉冲特写展示特征脉冲形状TRPS现可用于测定纳米颗粒和不同来源的EVs的真实尺寸分布。请注意下图中的纵轴代表不同尺寸范围内颗粒的个数浓度,而不是比率。TRPS技术是目前唯一可以实现可靠颗粒测定的方法 。任何高可信度的颗粒研究项目或者跟颗粒相关的规定都需要数据具有高可靠性和易得性。TRPS能够提供高质量的测量数据(如尺寸分布及颗粒浓度)并有望推动纳米颗粒研究的快速发展。

 

 

2 浓度测定

 

TRPS技术能获得非常准确的浓度信息:颗粒速度与浓度成正比关系,与颗粒组成无关,因此,一定尺寸范围内的颗粒浓度(Cmin-Cmax)可通过已知浓度的标准曲线计算得到。对于一张完整的数据图,需要同时提供颗粒浓度和尺寸分布,然而许多应用中,提供更简单的数据也同样合适。TRPS利用简单且可验证的方法提供准确、可靠的浓度。

 

 

3 尺寸电荷测定,包括Zeta电势


TRPS技术通过分析单个颗粒在不同驱动力下电阻式脉冲的持续时间,跟已知尺寸、表面电荷和个数浓度的标准样品比较,来逐个测定颗粒的表面电荷。每个脉冲的宽度与颗粒穿过锥形孔有关,通过分析脉冲宽度,可以获得每个颗粒的速度。通过测定颗粒速度,可以获得每个颗粒的电泳淌度,意味着可以同时获得颗粒的尺寸和电荷信息。跟大多数电荷测定技术一样,电泳淌度可以简单的转换为Zeta电势。

 

上图展示了不同脑脊液样品EVs的尺寸和带电情况,表明TRPS技术提供的EVs详细的电荷分析是一个十分实用的研究工具。来源于健康人样品(绿点)的颗粒平均Zeta电势为-17 mV,而来自于疾病样品(紫点)则为-15 mV(颗粒均溶于PBS溶液)。(校正颗粒以橙色显示)

 

外泌体分离鉴定系统

qNano

 

qNano 利用可控电阻式脉冲感应(TRPS)原理进行颗粒测定。功能强大且测量精准,取代了旧式激光测量方法。单一颗粒测量具有最高精度和可重复性,可用于测量:
? 尺寸及真实粒径分布
? 特定尺寸范围内的颗粒浓度
? 基于逐个颗粒的颗粒表面电荷测定


  



主要应用:

细胞外囊泡:外泌体|微粒|全血细胞|血小板
纳米医学:脂质体|纳米/微泡|高分子药物输送|能颗粒|免疫检测功能颗粒
病毒和疫苗特性描述:病毒|疫苗|细菌

 

qEV 细胞外囊泡(外泌体)分离柱

 

多种规格分离柱可供选择,实验体积从0.1ml到100ml,满足不同实验需求,最大程度降低实验操作成本。


AFC自动收集器


取代手工收集滤液,用于自动定量收集分离柱中流出的液滴,达到把不同活性组分装到不同试管中去的目的。它将进一步提高EV隔离的可重复性,并为您节省手动观察份数所需的时间。

很多研究人员怀疑自己养的细胞能不能做外泌体研究,其实不用担心,外泌体已知是细胞之间传递信息的信使,细胞没有独立存在的,任何表型的改变(肿瘤侵袭,干细胞修复,组织再生,胚胎发育等)都是经过细胞传递,外泌体介导的。相信这套外泌体分离鉴定系统能够给您的研究带来意想不到的结果!

 

 


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